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酵母表达系统优缺点
优点:克服大肠杆菌表达系统的不足,能繁殖快,高密度发酵,可以进行蛋白质翻译后的修饰合加工。
缺点:缺乏强有力的受严格调控的启动子,分泌效率低,尤其是对于分子质量大于30KD的目的蛋白分子几乎不分泌。不适于高密度培养。甲醇酵母表达系统:具有翻译后加工的功能,有适合真核生物基因产物正确折叠的细胞内环境和糖链加工系统。还能分泌目的基因产物导培养液中,有利于纯化等。
酵母表达系统是研究真核蛋白质表达和分析的有力工具,包括毕赤酵母表达系统和酿酒酵母表达系统,其拥有转录后加工修饰功能,适合于稳定表达有功能的外源蛋白质。与昆虫表达系统和哺乳动物表达系统相比,酵母表达系统操作简单,成本低廉,可大规模进行发酵,是较理想的重组真核蛋白质生产制备工具。
酵母表达系统的分类
酿酒酵母表达系统(酿酒酵母系统启动子、酿酒酵母分泌系统、酿酒酵母糖基化系统、酿酒酵母表达系统存在的问题)甲醇酵母表达系统(优缺点)A、表达水平高(最高水平的系统)B、产物可翻译后修饰:糖基化、磷酸化、酰脂化C、过糖基化程度比酿酒酵母少(8-15个vs100-150个甘露糖)D、产物可正确折叠和高效分泌(最高分泌表达系统)E、可利用简单无机盐培养基高密度发酵,生物量大。F、实验室和工业操作简单G、不能满足结构要求严格的糖基化其它酵母表达系统
s36沙龙会酵母表达系统服务内容
s36沙龙会科研人员建立了成熟的酵母表达纯化服务平台,提供优质的重组蛋白在毕赤酵母和酿酒酵母中的表达与纯化服务。
酵母表达系统服务项目:重组酵母表达质粒构建;重组质粒电转化;重组表达子筛选;小规模蛋白表达和纯化(2L培养基培养产物);大规模蛋白表达和纯化(10L以上)。
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